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      【柏恒科技小課堂】PCR反應(yīng)程序優(yōu)化之疾
      【柏恒科技小課堂】PCR反應(yīng)程序優(yōu)化之疾 發(fā)布時間:2025-06-17
      水之疾,至于漂石者,勢也”——《孫子兵法》。說只要速度足夠快,石頭就能漂在水面。上個月我們聊了一下降低退火變溫速率(PCR反應(yīng)程序優(yōu)化之緩)對PCR結(jié)果的優(yōu)化,今天換個方向,聊聊如何把PCR反應(yīng)時長進(jìn)行壓縮。在聊壓縮時長之前,需先對試管(Tube)/模塊(Block)控溫;普通/...
      • 2022

        4-6
        程序降溫盒使用經(jīng)驗分析
        程序降溫盒的使用方法直都搞不明白,覺得是不是應(yīng)該把程序降溫凍存盒先從-80度移到室溫放一段時間(細(xì)胞剛開始還沒凍的時候就是室溫),然后把細(xì)胞放進(jìn)去,再一起移到-80度,這樣才能實現(xiàn)程序降溫呢?時間使用長了,感覺里面的液體是不是異丙醇啊,使用...
      • 2022

        3-23
        三槽梯度PCR儀你真的了解嗎?
        一次性PCR擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之為梯度PCR儀。通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增,從而一次性PCR擴(kuò)增就可以篩選出表達(dá)量高的適合退火溫度進(jìn)行有效的擴(kuò)增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增,這...
      • 2022

        3-16
        程序降溫盒使用小技巧
        程序降溫盒在沒有酒精或任何液體的情況下,能確保在低溫冰箱中樣品的降溫速率為-1℃/分鐘。它們可以運用于各種細(xì)胞類型,包括干細(xì)胞,原代細(xì)胞和細(xì)胞系。這對于大多數(shù)需要培養(yǎng)的細(xì)胞系來說是非常理想的。已經(jīng)通過干細(xì)胞,原代細(xì)胞和細(xì)胞系的使用,證明了提...
      • 2022

        3-10
        迷你梯度PCR儀常用的五種分析方法
        迷你梯度PCR儀的梯度溫度控制是一項可有助于PCR中引物退火優(yōu)化的功能。梯度設(shè)定的目的是在模塊之間實現(xiàn)變化的溫度,通過每列之間≥2°C的間隔溫度升降,使得可同時對于一系列的溫度進(jìn)行測試以獲取引物退火溫度。該技術(shù)的一種形式便是設(shè)計帶有三個或更...
      • 2022

        3-1
        三槽梯度PCR儀科普知識大全,你真不一定都懂
        三槽梯度PCR儀溫度的準(zhǔn)確性可能會對PCR的成敗與否起決定性作用,因為PCR的三個主要步驟都依賴于溫度。類似地,加熱模塊上孔與孔之間的溫度一致性對于獲取可靠而可重復(fù)的PCR結(jié)果也是至關(guān)重要的。因此,所使用的PCR儀能在模塊之間準(zhǔn)確到達(dá)設(shè)定的...
      • 2022

        1-21
        雙槽梯度PCR儀應(yīng)該這樣使用
        雙槽梯度PCR儀的反應(yīng)原理類似于DNA的天然復(fù)制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性一退火(復(fù)性)--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:①模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)間后,使模板DN...
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