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      全自動梯度PCR儀可以自動完成PCR反應

      更新時間:2024-02-08      點擊次數:932
        全自動梯度PCR儀可以自動完成PCR反應的各個步驟,包括樣品加載、溫度控制、擴增循環等,大大簡化了PCR實驗操作的復雜度和時間,通過精確控制溫度,使引物與模板結合、變性、退火和擴增等PCR反應的各個步驟得以高效進行。溫度梯度功能允許在不同溫度下進行多個PCR反應,以尋找擴增條件。
       
        全自動梯度PCR儀的工作原理如下:
       
        1.將待測樣本加入PCR反應管(通常是一個細小的玻璃管),然后將其放置在設備的樣品盒中。
       
        2.在整個實驗開始之前,根據所需放大的目標DNA片段的序列信息,需要選擇合適的引物。在引物與模板DNA的結合過程中,溫度被加熱至引物與模板結合的溫度。
       
        3.在PCR擴增過程中,溫度是一個關鍵因素。梯度PCR儀有能力在不同的溫度區間中進行多個PCR反應,以幫助確定溫度范圍。因此,在實驗開始之前,用戶可以設置反應的溫度梯度,以使每個PCR反應管在反應過程中經歷不同的溫度。這有助于確定適合目標DNA片段擴增的最佳溫度。
       
        4.在PCR反應的初始階段,反應溫度被提高至變性溫度,通常為94-98°C。在此溫度下,DNA模板的雙鏈被解開,形成兩條單鏈DNA。
       
        5.在第二階段,溫度被降低至引物與模板結合的溫度。在此溫度下,引物會與目標DNA片段的模板互補配對。
       
        6.在第三階段,溫度被升高至延伸溫度,通常為72°C。在此溫度下,DNA聚合酶與引物中的基因組進行互補,并合成新的DNA鏈。
       
        7.實時監測:還配備了光學傳感器,可以實時監測PCR反應過程中DNA擴增的程度。通過監測PCR反應瓶中的熒光信號強度的變化,可以定量地評估DNA擴增的效果。
       
        全自動梯度PCR儀的使用方法:
       
        1.準備PCR反應液:根據實驗設計,按照適當的比例將模板DNA、引物、dNTPs和聚合酶等反應物混合在一起。
       
        2.將反應液分裝至PCR管或片上PCR孔中。
       
        3.將PCR管或PCR片放置在樣品位中。
       
        4.設置PCR反應參數:根據實驗需要,設定PCR儀的溫度程序、擴增循環次數等參數。
       
        5.點擊啟動按鈕,開始PCR反應。
       
        6.根據需要,可以監測PCR反應的進度和結果。
      全自動梯度PCR儀
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